1.问：测量不确定度评定中，校准品不确定度如何应用？

答：制造商一般给的不确定度为扩展不确定度（k=2），引入计算时需扩展不确定度除以2，得到标准不确定度。标准不确定度除以校准品靶值转换为相对标准不确定度，可用于不同浓度水平的不确定度计算。厂家校准品不确定度不应超过实验室目标测量不确定度（最大允许测量不确定度）的50%。

2.问：HPV基因分型检测项目可检测多种HPV型别，而上海市临床检验中心提供的该项目阳性室内质控品为单一HPV型别（如HPV16、HPV18等），实验室订购该质控品时该如何选择和使用？

答：根据《上海市临床检验质量控制标准（2024年版）》室内质量控制要求，HPV基因分型检测项目每批次实验均需设置弱阳性和阴性质控品。但实验室在开展室内质控时，弱阳性室内质控品无需每一批次均包含所有试剂盒所检测HPV型别，可每批次选择一种或几种型别，而后依据检测频率定期（如3个月、半年等）更换其它型别，以便于监测到所有试剂盒检测所涉及HPV型别。因此，实验室订购HPV基因分型室内质控品时可根据所需数量选择不同HPV型别质控品，后续使用过程中定期轮换使用。

3.问：对于液相色谱-质谱联用系统，为什么要做系统适用性测试？

答：对液相色谱-质谱联用系统进行系统适用性测试有以下作用：第一，早发现问题。在开始分析之前，先确认保留时间、峰形、分辨率、信噪比、压力、真空等关键参数是否合格；第二，快速定位故障。系统适用性测试失败（如峰丢失、拖尾、信噪比下降）提示可能存在柱效降低、离子源污染、管路漏液等情况，需要立即维护，而不是等到整批样品做完才发现；第三，纵向性能追踪。同一份（或同一批）每天/每序列重复进样，可建立仪器响应基线，便于观察灵敏度漂移、柱效下降或内标回收变化，为预防性维护提供量化依据；第四，节约时间与成本。避免大规模重新提取、重新进样或数据作废，降低实验延误和样品浪费风险。系统适用性测试样本，通常把目标分析物和内标用纯溶剂稀释到“接近提取后最低检测限”或“线性中点”浓度。可以是单标、混标或混合提取物；多组分方法可只选代表性化合物；若化学稳定性差，也可直接用低浓度校准品代替。

2025年12月1日